穿刺组织印片诊断骨转移性肿瘤一例
患者男性,55岁。全身多发骨病变,在CT引导下行髂骨穿刺。组织学结果显示少许破碎的骨及纤维组织,肿瘤性证据不明确(图1)。并同时进行了穿刺组织细胞学印片检查,结果显示少数分化较好的上皮细胞,细胞学不能除外转移性病变(图2)。患者临床MRI检查提示全身多发骨质破坏,考虑转移;前列腺右侧外侧带和中央带占位,考虑前列腺癌。
 
 
图1  髂骨穿刺组织学检查显示少许破碎的骨及纤维组织。
 
图2  髂骨组织细胞印片显示少量分化好的上皮样细胞。
 
遂对穿刺组织再次仔细观察并进行免疫组化,结果显示肿瘤细胞表达AE1/AE3、CK8/18、PSA(图3)、P504S,而TTF1和CK7表达阴性。
 
图3  骨穿刺标本组织学及免疫组化(PSA)检测
 
病理诊断:(髂骨)转移性腺癌,结合免疫组化结果,考虑转移性前列腺癌。
 
讨论
 
细胞印片多见于术中快速冰冻标本中进行,对CT引导下骨穿刺标本进行细胞印片报道较少。2006年至2017年十年间,我院共有CT引导下骨穿刺印片366例,其中362例有组织学对照,诊断一致率达92.8%。
 
26例细胞学与组织学诊断不一致,其中11例印片中查见异型细胞或肿瘤细胞,而组织学未查见(有3例经再次活检证实为阳性)。8例组织学查见异型细胞或肿瘤性病变,而细胞学不能明确,其主要原因可归为3种情况:a,印片中有效细胞数量过少;b,印片中细胞保存不佳,退变显著;c,细胞学对间叶性肿瘤或原发骨病变不敏感。
 
穿刺组织印片的诊断与技术要点
 
技术:技术员的培训,制片时尽量多的保留细胞,如需做HE染色必须在制片后立即放入95%酒精中固定;MGG染色为自然干燥,可一定程度弥补HE染色中的退变问题(图4)。
 
图4 穿刺样本的处置及合理分配---穿刺组织条+细胞印片
 
诊断:细胞病理医生的规范化培训,包括扎实的组织学诊断基础及细胞病理的专科培训,系统化的知识体系,及对正常细胞和异常细胞的准确识别。需要临床、形态和免疫组化三结合,必要时分子检测。
 
组织印片对骨占位性病变的诊断具有重要的临床意义,组织活检+组织印片相结合敏感性和准确度更高!
 
 骨组织细胞印片中,常见到具有上皮样细胞形态的病变,它们可分为骨原发性病变和转移性病变,主要形态及免疫标记总结如下:
 
1.具有上皮细胞形态的原发骨病变:
 
1.1脊索瘤:几乎主要累及中轴骨,颅底与骶尾部最常见。细胞学表现为丰富的黏液样基质,呈丝状或球状外观(图5)。典型的肿瘤细胞体积大,呈空泡状外观,MGG染色可见丰富的紫色胞质内空泡,细胞核居中。免疫组化表达S-100、Brachyury、CK。
 
图5  骨脊索瘤的细胞学特征
 
1.2骨造釉细胞瘤:罕见,常位于胫腓骨。细胞涂片表现为出血性背景中的基底样细胞簇,局部周边呈栅栏状排列。仅有少量散在的单个细胞。肿瘤细胞呈双相性,由圆形至椭圆形的“上皮样”细胞和梭形细胞组成(图6)。上皮样肿瘤细胞中等大小,圆形、椭圆形或梭形,胞浆少而淡染,细胞核苍白、染色质均匀、细颗粒状。梭形细胞表现为几乎裸露的细胞核,核染色深、染色质粗颗粒状。上皮样肿瘤细胞表达CK、P63、P40。
 
图6  骨造釉细胞瘤的细胞学特征
(图片引自:Primary  Tibial  Adamantinoma Diagnosed by Fine Needle Aspiration . Diagnostic Cytopathology)
 
2.常见的骨转移性肿瘤的细胞学特征:
 
2.1肺癌:单发性骨转移灶最常见的原因。转移性肺腺癌的穿刺物中富含细胞成分,含有较大的上皮肿瘤细胞,异型性显著。转移性鳞癌常常可见角化和坏死(图7)。肺腺癌常表达CK7、TTF1和NapsinA;鳞癌常表达p40和p63;小细胞癌表达TTF1、Syn、CgA和CD56等。
 
图7  骨转移性肺癌细胞学特征
 
2.2结直肠癌:结肠癌是消化道恶性肿瘤中最常见的以骨转移为最早临床症状的肿瘤。穿刺物富含细胞成分,细胞常常呈团状、大片状或散在。由柱状肿瘤细胞形成的片状结构的边缘可见肿瘤细胞的细胞核呈栅栏状排列是结肠癌的一个特征(图8)。常见坏死。表达CDX-2、VILLIN、SATB2等。
 
图8 骨转移性结直肠癌细胞学特征
(图片引自:KOSS诊断细胞学及其组织病理学基础 第5版)
 
2.3乳腺癌:较易转移至骨,最常侵犯的部位是椎体、骨盆等。导管癌的典型表现是肿瘤细胞形成不规则团片状,细胞核拥挤、相互重叠。肿瘤细胞体积大,胞质丰富,细胞核高度异型,染色质团块状,核仁明显。小叶癌的肿瘤细胞相对较小,卵圆形,细胞核偏位,染色质较为均一、浓集。部分细胞内可见一大空泡、中间为浓缩的黏液包涵体,称作“靶细胞”(图9)。免疫标记有GATA-3、GCDFP15、mammaglobin、ER、PR、HER-2等。
 
图9 骨转移性乳腺导管癌和小叶癌细胞学特征
(图片引自:KOSS诊断细胞学及其组织病理学基础 第5版)
 
2.4前列腺癌:前列腺癌引起成骨性骨转移,最常侵犯椎体和骨盆。转移灶可因显著的成骨反应而被掩盖,穿刺物常常是硬化的骨质,而缺乏可辨别的肿瘤细胞。肿瘤细胞可表现为单个散在分布,或形成片状或腺样结构。瘤细胞没有特征性的表现,细胞体积大,可见清晰的大核仁(图10)。中高分化的前列腺癌可见微腺样结构,类似小的菊形团,核位于周边部,中央为无定形的胞质样物质。免疫组化表达PSA、PSAP。
 
图10  骨转移性前列腺癌细胞学特征
 
2.5肾癌:肿瘤细胞单个或排列成小团状,偶见大的立体结构。肿瘤细胞富含透明的细胞质,内含较多小空泡,细胞边界不清。核仁显著(图11)。表达RCC、PAX-8、CD10、CA9等。
 
图11 骨转移性肾细胞癌细胞学特征
(图片引自:KOSS诊断细胞学及其组织病理学基础 第5版)
 
2.6甲状腺癌:在所有的甲状腺癌中,滤泡性癌最常发生骨转移。甲状腺滤泡性癌骨转移的穿刺物中可见均一的小细胞单个出现在立体的细胞团中,有时可形成中央为胶质的滤泡状结构。胶质也可呈无定形状态分布于涂片的背景中。细胞核染色质颗粒状,核仁清晰。表达TTF-1、TG。

参考文献
1.Primary Tibial Adamantinoma Diagnosed by Fine Needle Aspiration . Diagnostic Cytopathology
2.KOSS诊断细胞学及其组织病理学基础 第5版