【技术交流】免疫组化技术在病理诊断中的应用

免疫组化抗体神器

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  由于免疫组化具有特异性强、敏捷度高、定位正确等特点,且能将形态研究与功效研究有机地联合在一起,以是,这门新技能已被遍及地应用于生物学和医学研究的很多范畴。在病理学研究中,免疫组化技能的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例,在免疫组化技能出现曩昔,对肿瘤的诊断和分类还范围于细胞程度,而引入免疫组化技能后,则使研究的深度进步到了生归天学程度、分子程度。比年来,陪同基因探针研究而鼓起的核酸分子原位杂交技能也正在发达生长,更使免疫组化为虎傅翼,两者相得益彰,将研究推进到了基因程度。
【技术交流】免疫组化技术在病理诊断中的应用
免疫组化片
  辨认细胞产品
  使用某些细胞产品为抗原制备的抗体,可作为相应产品的特别标记,如内排泄细胞孕育发生的种种激素,大多数可用免疫组化技能标记出来,据此可对内排泄肿瘤作功效分类,检测排泄异位激素的肿瘤等。
  确定细胞范例
  通过特定抗体标记出细胞内相应抗原身分,以确定细胞范例。如角卵白是上皮性标记,前线腺特异性抗原仅见于前线腺上皮,甲状腺球卵白抗体是甲状腺滤泡型癌的敏感标记,而降钙素抗体是甲状腺髓样癌的特有标记。有些细胞(如表皮内朗格汉斯细胞、玄色素细胞、淋逢迎内指突状和树突状网织细胞)光镜下不易辨认,但免疫组化标记(S-100卵白等)能明白表现其形态。
  判定病变性子
  通过标记Ig轻链(κ、λ)可区分部门B细胞性淋巴瘤与B细胞反响性增生,前者常表达单一的Ig轻链(κ+/λ+),后者常为多克隆Ig轻链(κ+、λ+)。而标记Bcl-2卵白在区别滤泡型淋巴瘤和反响性滤泡增生上有相称的意义。在滤泡型淋巴瘤,90%以上肿瘤性滤泡细胞有bcl-2的高表达;而在滤泡反响性增生时,滤泡反响中央的细胞不表达Bcl-2卵白,而套细胞则表达。
  发明微小转移灶
  某些癌的早期转移偶然与淋逢迎内窦性构造细胞增生不易区别。用通例病理构造学要领要在一个构造中认出单个转移性肿瘤细胞或几个细胞是不大概的,而接纳免疫组化要领(如用上皮性标记)则非常有助于微小(癌)转移灶的发明。对转移性肿瘤也可借助免疫组化标记探求原发瘤,如骨构造内有前线腺特异性抗原阳性细胞,提示前线腺癌转移。
  探究肿瘤劈头或分解表型
  一些泉源不明的肿瘤恒久争论不断,末了通过免疫组化标记着得共鸣。如颗粒性肌母细胞瘤,曾被以为是肌源性的,但该肿瘤肌源性标记阴性,而神经性标记阳性,证明为神经泉源(大概来自神经鞘细胞)。分解很差的肿瘤病理上常按细胞形态分为梭形细胞肿瘤、小圆细胞肿瘤等,通过多种标记的团结应用,也大概确定泉源。
  引导治疗和预后
  免疫组化标记中与预后有关的标记大抵可分为三类:①类固醇激素受体:如雌激素受体、孕激素受体等,它们与乳腺癌的干系已获公认,性激素受体阳性者内排泄治疗结果较好,预后也较好。相似的结果也见于子宫内膜癌和卵巢癌。②肿瘤基因标记:如癌基因c-erB-2,c- myc,P53卵白等,在肿瘤中高度表达者,患者预后较差;而nm23卵白高度表达者,肿瘤转移率较低,预后较好。③细胞增殖性标记:如表皮生长因子受体(EGFR)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67等,表达指数越高,评释其增殖越活泼,恶性度增高,预后不良,此中以恶性淋巴瘤、乳腺癌较为显着。并且在乳腺癌的研究中发明Ki-67、 PCNA 、EGFR阳性者,淋逢迎转移率高,并与激素受体的表达呈负相干。
  相识分解程度
  大多数标记物都有其特定的漫衍部位,如上皮细胞膜抗原(EMA)着色部位在细胞膜上,但差分解乳癌胞浆内也可出现阳性颗粒;角卵白的含量也与分解程度有关,低分解或未分解癌含量较低、染色较弱。
  确定肿瘤分期
  果断肿瘤是原位照旧浸润及有无血管、淋巴管侵袭与肿瘤分期亲昵相干。用通例病理要领果断偶然是非常困难的,但用免疫组化法可得到明白结果。如接纳层粘连卵白和Ⅳ型胶原的单克隆抗体可明白表现基底膜的重要身分,一旦证明上皮性癌突破了基底膜,就不是原位癌,而是浸润癌了,其预后是差另外。用第八因子相干卵白、荆豆凝聚素等表现血管和淋巴管内皮细胞的标记物则可明白表现肿瘤对血管或淋巴管的浸润。对很多肿瘤的良恶性辨别及有无血管或淋巴管浸润,这是重要的辨别依据,同时也有治疗及预后意义。
  探求感抱病因
  人体疾病的致病微生物中有的在通例病理查抄中不易发明,尤其是病毒性致病微生物,由于其分子程度的布局,在细胞程度上难以发明,通过免疫组化要领则可明鹤发明病原体抗原部位以及定量,如大小胞病毒(CMV)、人乳头状瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSV)、乙型肝炎病毒(HBV)等,已有商品化标记物帮助办理病因诊断题目。
  帮助疾病诊断和分类
  人体的免疫性疾病,重要是自身免疫性疾病,如肾小球肾炎、皮肤自身免疫性疾病等,可用免疫组化要领对构造细胞内的免疫球卵白、补体、免疫复合物等举行检测以帮助诊断。某些疾病的分类或分型也是在免疫组化底子上创建的。内排泄肿瘤如垂体前叶腺瘤,凭据其排泄功效可分为生长激素腺瘤、泌乳激素腺瘤等10型;胰岛细胞瘤的功效分类为胰岛素瘤、高血糖素瘤等6种;恶性淋巴瘤凭据瘤细胞外貌标记差别可分为T细胞性、B细胞性。肾小球肾炎的免疫学分类亦需免疫组化或免疫荧光技能。

  参考资料:
  易生物实验:《免疫组化技术在病理诊断中的应用》
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责任编辑: 张小婷
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